類風濕性關節炎 (RA) 是一種影響關節的慢性炎症性疾病，如果不及時治療，可能會造成不可逆轉的結構性損傷。患者需要長期的抗關節炎治療，但也會導致耐藥和治療失敗。因此，瞭解耐藥機制對於改善RA治療至關重要。澳門科技大學埃爾文內爾博士生物物理與創新藥物實驗室（以下簡稱澳科大諾獎實驗室）執行主任黃錦偉教授領導的科研團隊近期發表了一項新的研究。 研究旨在瞭解抑癌基因-p53基因突變在類風濕關節炎（RA）患者甲氨蝶呤（MTX）耐藥中的潛在機制。 該研究具有多個突破性的進展：（1）研究人員繪製了RA患者p53基因的突變圖譜，該圖譜具有較高的覆蓋性，並包含了多個p53的熱點突變；（2）利用定點突變分子克隆技術建立了首個RA患者的p53突變體質粒文庫；(3)用過表達所有 RA 相關 p53 突變體的質粒轉染 RA 成纖維樣滑膜細胞 (RAFLS)，並測量細胞對 MTX 的存活率以評估 MTX 細胞毒性。 研究發現，RAFLS 中大多數過表達的 p53 突變體產生了增加的 MTX 抗性表型;(4)p53 基因中的一些突變能夠導致抗凋亡蛋白的上調和促凋亡蛋白的下調。此外，多個p53 突變體的細胞凋亡比例和caspase-3（凋亡生物標誌物）活性均處於較低水準。表明細胞抗凋亡能力的發展，而RAFLS 細胞中的耐藥表型是由這些突變所驅動的；（5）一些RA 相關的 p53 基因突變會促進 RAFLS 的細胞遷移，表現為遷移標誌物表達的上調和更迅速的傷口癒合或侵襲作用；（6）建立了一個以p53突變為基礎的甲氨蝶呤耐藥平臺及藥物篩選平臺。 總括而言，該研究表明一些p53基因突變可能會影響MTX治療RA患者的藥物療效，進而阻礙疾病的治療（圖1）。
這項探索性研究的意義在於為RA耐藥性的研究提供了新的見解，並揭示了p53概念的新進展以及與翻譯後功能相關的新發現。這對於治療因p53突變而導致甲氨蝶呤耐藥的RA患者具有指導意義，同時也有助於進一步開發針對p53突變的抗關節炎藥物。該研究論文發表於 Genes & Diseases (2021年影響因數：7.376; https://doi.org/10.1016/j.gendis.2023.02.007)。澳門科技大學黃錦偉教授為通訊作者之一。澳門科技大學邱聰齡博士、碩士生陳芷慧和張偉為論文共同第一作者。該項成果受到澳門科學技術發展基金（項目編號：003/2019/AKP）和五邑大學-澳門聯合基金(NO.2019WGALH01)的支持。
圖1： RAFLS中具有MTX耐藥表型的p53突變體顯示出凋亡和遷移表型的改變