类风湿性关节炎 (RA) 是一种影响关节的慢性炎症性疾病，如果不及时治疗，可能会造成不可逆转的结构性损伤。患者需要长期的抗关节炎治疗，但也会导致耐药和治疗失败。因此，了解耐药机制对于改善RA治疗至关重要。澳门科技大学埃尔文内尔博士生物物理与创新药物实验室（以下简称澳科大诺奖实验室）执行主任黄锦伟教授领导的科研团队近期发表了一项新的研究。 研究旨在了解抑癌基因-p53基因突变在类风湿关节炎（RA）患者甲氨蝶呤（MTX）耐药中的潜在机制。 该研究具有多个突破性的进展：（1）研究人员绘制了RA患者p53基因的突变图谱，该图谱具有较高的覆盖性，并包含了多个p53的热点突变；（2）利用定点突变分子克隆技术建立了首个RA患者的p53突变体质粒文库；(3)用过表达所有 RA 相关 p53 突变体的质粒转染 RA 成纤维样滑膜细胞 (RAFLS)，并测量细胞对 MTX 的存活率以评估 MTX 细胞毒性。 研究发现，RAFLS 中大多数过表达的 p53 突变体产生了增加的 MTX 抗性表型;(4)p53 基因中的一些突变能够导致抗凋亡蛋白的上调和促凋亡蛋白的下调。此外，多个p53 突变体的细胞凋亡比例和caspase-3（凋亡生物标志物）活性均处于较低水准。表明细胞抗凋亡能力的发展，而RAFLS 细胞中的耐药表型是由这些突变所驱动的；（5）一些RA 相关的 p53 基因突变会促进 RAFLS 的细胞迁移，表现为迁移标志物表达的上调和更迅速的伤口愈合或侵袭作用；（6）建立了一个以p53突变为基础的甲氨蝶呤耐药平台及药物筛选平台。 总括而言，该研究表明一些p53基因突变可能会影响MTX治疗RA患者的药物疗效，进而阻碍疾病的治疗（图1）。
这项探索性研究的意义在于为RA耐药性的研究提供了新的见解，并揭示了p53概念的新进展以及与翻译后功能相关的新发现。这对于治疗因p53突变而导致甲氨蝶呤耐药的RA患者具有指导意义，同时也有助于进一步开发针对p53突变的抗关节炎药物。该研究论文发表于 Genes & Diseases (2021年影响因数：7.376; https://doi.org/10.1016/j.gendis.2023.02.007)。澳门科技大学黄锦伟教授为通讯作者之一。澳门科技大学邱聪龄博士、硕士生陈芷慧和张伟为论文共同第一作者。该项成果受到澳门科学技术发展基金（项目编号：003/2019/AKP）和五邑大学-澳门联合基金(NO.2019WGALH01)的支持。
图1： RAFLS中具有MTX耐药表型的p53突变体显示出凋亡和迁移表型的改变